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猪衣原体病确诊方法

猪衣原体病确诊方法

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可根据该病的流行病学、临床特点和病理变化等可做出初步诊断,确诊需做实验室检查.

(一)细菌学(bacteriology)诊断

无菌采取死猪的肝、脾、肺、排泄物、病损关节液、流产胎猪及胎盘等病料,磨碎加缓冲生理盐水(sodium chloride)稀释成20%悬液,在每毫升悬液中加1mL链霉素(streptomycin)或1mg卡那霉素(kanamycin)杀死杂菌,经1000r/min离心沉淀10min,取上清液重复离心两次,最后取上清液0.5mL接种在5-7日龄鸡胚的卵黄囊内,鸡胚常在接种后3-10d死亡.

也可用0.2mL接种于3-4周龄

的小白鼠腹腔内,如果病料中含有衣原体(chlamydia),往往引起小鼠发生腹膜炎,腹腔中积聚大量纤维素性渗出物,以致接种鼠出现腹腔显著膨大,脾脏肿大等特征性病变.

也可经鼻内、脑内接种,接种后1-3周死亡,部分活仔鼠也常在2 - 3d内发病,出现呼吸器官、中枢神经系统病损及卡他性化脓性角膜结膜炎.

感染动物的腹腔渗出液涂片中,可发现衣原体包涵体.

采集病料后,也可涂片以Cimenez, Stamp和Giemsa方法染色,能见到肝、脾、肺上有稀疏的衣原体.

膀胱和胎盘涂片有时可见到大量衣原体及包涵体.

(二)血清学诊断

血清学试验有补体结合反应(CF)、血凝抑制( HI)试验、团集补体吸收(CCA)试验、毛细血管凝集(CTA)试验、琼脂凝胶沉淀试验(AGP)、间接血凝试验(INA)、免疫荧光及免疫酶试验等.

CF是国内使用的经典方法,一般用处理

过的衣原体属特异性抗原测定被检血清.

该法特异性较好,但灵敏度不够高,猪衣原体病诊断不太适宜用本法.

虽发展了间接补体结合试验,但因操作繁琐影响了使用.

HI、CCA、CTA方法较简单、敏感,但可靠性和有效性需进一步验证.

血清浓度高时,易发生非特异性凝集.

ACP灵敏度有时不及CF试验.

IHA诊断抗原效价下降较快,有时出现非特异性反应.

免疫荧光和免疫酶试验属现代标记抗体

技术,如标记抗体的质量很高,可大大提高检测衣原体抗原或抗体的灵敏度和特异性.

近年来,免疫酶联染色法、Dot -ELISA、衣原体单克隆抗体、核酸杂交与核酸探针技术等在衣原体方面的应用开始起步.

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